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生物安全實(shí)驗(yàn)室自查報(bào)告

時(shí)間:2025-01-14 06:57:06 自查報(bào)告 我要投稿

生物安全實(shí)驗(yàn)室自查報(bào)告集錦

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生物安全實(shí)驗(yàn)室自查報(bào)告集錦

生物安全實(shí)驗(yàn)室自查報(bào)告集錦1

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

  1、掌握顯示細(xì)胞中過(guò)氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。2。了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義

  3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法

  二、實(shí)驗(yàn)原理:

  1、細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶能把許多胺類(lèi)氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來(lái)判定過(guò)氧化物酶的.有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

  2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過(guò)程。

  3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)ㄟ吘壔;?xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

  三、實(shí)驗(yàn)步驟:

  細(xì)胞中過(guò)氧化物酶的顯示

  1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;

  2、取骨髓細(xì)胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開(kāi)股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開(kāi)的小孔中,摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上;

  3、涂片:用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi),室溫晾干;

  4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿(mǎn)涂片為宜,處理30秒—1分鐘。

  5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘(以蓋滿(mǎn)涂片為宜)

  6、清水沖洗,番紅復(fù)染2min。

  7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)

  細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)與觀察吉姆薩染色:

  1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)

  2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞

  3、95%乙醇固定5min

  4、PBS緩沖液洗2次

  5、吉姆薩染色液染色5min

  6、蒸餾水輕輕洗去染液

  7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。

  吖啶橙染色:

  1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)

  2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞

  3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min

  4、PBS緩沖液洗2次每次1min

  5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min

  6、蒸餾水輕輕洗去染液

  7、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。

  四、結(jié)果與分析:

  1、根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個(gè)視野的統(tǒng)計(jì),該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9

  2、Hela細(xì)胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)

  五、思考題:

  1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制

  細(xì)胞凋亡是一個(gè)受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動(dòng)自殺過(guò)程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控。

  2、細(xì)胞凋亡的特征

  凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)ㄟ吘壔患?xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。

  3、研究細(xì)胞凋亡的方法

  定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)

  定量或半定量的研究方法:各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

生物安全實(shí)驗(yàn)室自查報(bào)告集錦2

  為深入實(shí)施《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全條例》,進(jìn)一步規(guī)范我院實(shí)驗(yàn)室生物安全管理,根據(jù)上級(jí)安排,對(duì)我院實(shí)驗(yàn)室生物安全管理進(jìn)行自查,情況如下:

  一、實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)和備案情況

  醫(yī)院檢驗(yàn)科已于20xx年x月向衛(wèi)計(jì)委申請(qǐng)BSL2實(shí)驗(yàn)室備案,實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)已于20xx年x月通過(guò)邢臺(tái)市臨檢中心現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審。

  二、實(shí)驗(yàn)室生物安全組織機(jī)構(gòu)、管理體系及各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況

  我院已成立生物安全委員會(huì)及工作領(lǐng)導(dǎo)小組,委員會(huì)明確了職責(zé),建立了工作制度,檢驗(yàn)科在此基礎(chǔ)上建立實(shí)驗(yàn)室安保制度,并定期對(duì)有關(guān)生物安全各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況進(jìn)行檢查,對(duì)存在的問(wèn)題及時(shí)進(jìn)行整改。實(shí)驗(yàn)室所從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)均嚴(yán)格遵守有關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程,并指定專(zhuān)人監(jiān)督檢查實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程的落實(shí)情況。同同時(shí),對(duì)檢查情況進(jìn)行詳細(xì)記錄,定期召開(kāi)會(huì)議討論工作中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題,及時(shí)糾正。

  三、人員培訓(xùn)與管理

  目前檢驗(yàn)科共有工作人員4名,全部為專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員,三名均獲得檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)資格資質(zhì),并建有實(shí)驗(yàn)室工作人員健康檔案,所有實(shí)驗(yàn)室的活動(dòng)均符合有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程,非實(shí)驗(yàn)有關(guān)物品不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)操作人員防護(hù)水平符合相關(guān)規(guī)定。

  四、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、設(shè)施及設(shè)備

  實(shí)驗(yàn)室入口處張貼有生物安全危害標(biāo)識(shí),走廊設(shè)置緊急撤離路線標(biāo)識(shí),實(shí)驗(yàn)室內(nèi)整潔無(wú)與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)物品,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各消毒用品均在有效期內(nèi),實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)有洗手池及洗眼裝置。各儀器運(yùn)行狀態(tài)正常,均有相關(guān)操作及維護(hù)程序,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備1臺(tái)生物安全柜,放置位置合理,使用規(guī)范,均已定期更換濾網(wǎng)并委托專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果合格。

  五、實(shí)驗(yàn)室記錄和檔案

  目前實(shí)驗(yàn)室尚未通過(guò)生物安全審批,但已申請(qǐng)備案,病原微生物實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)均有記錄,樣本保存及銷(xiāo)毀均有記錄,消毒液配制及使用均有記錄,實(shí)驗(yàn)室備有緊急安全防護(hù)裝備(隔離衣、防護(hù)服、護(hù)目鏡、N95口罩、橡膠手套)定期檢查,均在效期,實(shí)驗(yàn)室各設(shè)備均有使用維護(hù)記錄,操作人員已通過(guò)考核。

  六、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案

  實(shí)驗(yàn)室有針對(duì)相關(guān)意外事故的緊急預(yù)案,工作人員能熟練掌握并及時(shí)處理。

  七、防護(hù)

  有專(zhuān)門(mén)人員承擔(dān)院感控制工作,實(shí)驗(yàn)室人員每年有體檢,并有健康檔案,個(gè)人防護(hù)用品充足。

  八、菌(毒)種和樣本的儲(chǔ)藏與管理

  目前本實(shí)驗(yàn)室不保存病原微生物菌(毒)種病原微生物,樣本管理嚴(yán)格登記制度,樣本在離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前均進(jìn)行高壓滅菌銷(xiāo)毀時(shí)做好銷(xiāo)毀登記。

  九、實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理

  按照《醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄》對(duì)醫(yī)療廢物進(jìn)行分類(lèi)收集、包裝物、容器符合標(biāo)準(zhǔn),警示物品醒目,不存在醫(yī)療廢物混入生活垃圾的'情況,使用后的一次性醫(yī)療器械按照感染性廢物進(jìn)行銷(xiāo)毀、消毒管理,醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)運(yùn)交接完整。從業(yè)人員每年進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn),并配備必要防護(hù)用品,實(shí)驗(yàn)室要對(duì)樣本進(jìn)行高壓滅菌并記錄欠完整,實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面消毒沒(méi)有登記。

  整改具體措施

  1、管理者及工作人員對(duì)生物安全的認(rèn)識(shí)和管理水平尚不夠高,在思想上、管理制度上準(zhǔn)備不充分,對(duì)于個(gè)人防護(hù)及環(huán)境生物污染的意識(shí)不強(qiáng),從而導(dǎo)致條例、法規(guī)、制度的不完善,管理力度不足。所以要進(jìn)一步完善各種規(guī)章制度,加強(qiáng)管理力度。

  2、多年來(lái)實(shí)驗(yàn)室工作人員大多數(shù)專(zhuān)業(yè)人員只偏向于檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)技術(shù)的提高,未系統(tǒng)學(xué)習(xí)生物安全方面的知識(shí),對(duì)預(yù)防微生物污染的意識(shí)不強(qiáng),缺乏具體的技術(shù)操作規(guī)范。所以,加強(qiáng)生物安全方面的知識(shí)的培訓(xùn),對(duì)全科工作人員進(jìn)行生物安全知識(shí)考試。

  3、建立了實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面消毒登記本。完善了高壓鍋消毒登記,加強(qiáng)了生物安全的管理。

  通過(guò)這次對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作自查,提高提高了全體檢驗(yàn)人員對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作重要性的認(rèn)識(shí),加強(qiáng)管理,采取有效整改措施,確保實(shí)驗(yàn)室工作安全

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